转染试剂（DNA / RNA） - 上海质因生物科技有限公司

DNA 转染试剂标准版和强效版怎么选？

<p>标准版适用于 HEK293/293T、HeLa、HCT116、A549 等常见贴壁与悬浮细胞，追求性价比；强效版针对原代细胞、干细胞、部分肿瘤细胞等难转染细胞优化，在保持低细胞毒性的同时用量更少、转染效率更高。</p>

转染前细胞密度多少合适？

DNA 转染贴壁细胞建议 50%–70% 汇合度；RNA 转染建议 30%–50% 汇合度；悬浮细胞 2×10⁶–4×10⁶ 个/mL。密度过高或过低都会降低转染效率。

转染时可以用含血清培养基和双抗吗？

稀释核酸与转染试剂时建议使用无血清培养基或 Opti-MEM，复合物形成后加入含血清培养基通常不影响效率。双抗可能增加细胞通透性而降低活性，建议转染体系中避免使用；若细胞敏感，同样建议去除抗生素。

转染效率低怎么办？

DNA 转染：检查细胞是否处于对数期且无污染、质粒纯度（A260/A280 ≥1.8）与内毒素水平，并优化 DNA / 试剂比例（建议 1:1–1:2.5）与细胞密度。RNA 转染：提高 siRNA 与试剂浓度、检测 24–96 h 多个时间点、确认耗材无 RNase、使用 PAGE 纯化并脱盐的 siRNA、确认退火条件正确。

转染后细胞毒性大或死亡怎么办？

常见原因包括细胞状态差、质粒不纯或内毒素过高、试剂用量过大、换液不及时。可减少试剂体积、缩短复合物与细胞共孵育时间、转染后 4–6 h 更换新鲜培养基，并核实靶基因沉默本身是否影响细胞活力。

siRNA 转染后多久检测效果？

mRNA 水平通常在 24 h 后开始下降，蛋白水平在 48–72 h 变化明显，建议设置 24、48、72 h 多个时间点检测。DNA 转染则在转染后 24–40 h 即可检测表达。

RNA 转染试剂能用于 miRNA 和 saRNA 吗？

可以。ZY FectEasy RNA 转染试剂适用于 siRNA、miRNA mimic / inhibitor、saRNA 等多种小 RNA 分子的细胞递送，在 HeLa、MCF7、NIH-3T3 等常见细胞中低浓度即可获得 90% 以上的抑制效率，对 K562、THP-1 等悬浮细胞也可达 80% 以上。