Mini最快交付周期
常规生产规模
转染级超螺旋比例
可选极低内毒素
质粒质量直接决定酶切、测序、克隆、细胞转染、动物注射、基因治疗、疫苗开发等下游实验的成败。
质因生物提供覆盖μg、mg至g级别的高纯度质粒抽提服务，可选内毒素去除。通过优化的碱裂解与纯化工艺，最大程度保持质粒完整性和高超螺旋比例，满足从常规分子实验到敏感细胞转染、动物体内研究的不同需求。
| 服务等级 | 内毒素标准 | 制备规模 | 交付周期 | 价格 |
科研级 |
不适用（不去内毒素） | μg至mg级别 | 3个工作日起 | 咨询 |
转染级 |
<0.05 EU/μg | μg至mg级别 | 3-5个工作日起 | 咨询 |
转染级（超低内毒素） |
<0.01 EU/μg | μg至mg级别 | 4-6个工作日起 | 咨询 |
转染级（极低内毒素） |
<0.005 EU/μg | μg至mg级别 | 5-7个工作日起 | 咨询 |
服务说明：支持μg至mg级质粒制备；更大规模可按项目定制。转染级提供多档内毒素控制标准。
| 服务项目 | 说明 | 增加周期 |
| 内毒素去除升级 | 从科研级升级为转染级，或提升标准档位 | 1-2个工作日 |
| 全质粒测序验证 | Sanger法完成全质粒序列验证 | 3-5个工作日 |
| 限制性酶切分析 | 验证质粒完整性及插入片段 | 1个工作日 |
| 超螺旋比例测定 | 凝胶电泳灰度分析 | 1个工作日 |
| 残留RNA/DNA检测 | 检测宿主RNA及基因组DNA残留 | 1-2个工作日 |
选择建议：敏感细胞、动物实验或病毒包装项目，可按需升级内毒素和完整性验证标准。
| 检测项目 | 科研级 | 转染级 | 检测方法 |
| 浓度 | 检测 | 检测 | A260 |
| A260/A280 | 1.8-2.0 | 1.8-2.0 | 紫外分光 |
| 超螺旋比例 | ≥80% | ≥90% | 凝胶灰度分析 |
| 内毒素 | — | <0.05 EU/μg（可升级） | LAL法 |
| 残留RNA | — | 未检出 | 凝胶/专用检测 |
| 残留基因组DNA | — | 未检出 | 专用检测 |
| 限制性酶切 | 可选 | 可选 | 酶切电泳 |
| 全质粒测序 | 可选 | 可选 | Sanger测序 |
转染级质粒增加内毒素、残留RNA及宿主基因组DNA检测，并附相应QC报告。
| 应用类型 | 建议内毒素水平 | 选择说明 |
| 常规分子生物学实验 | 通常无需控制 | 酶切、克隆、测序等基础实验 |
| 常规细胞转染 | <0.1 EU/μg | 常见细胞系转染与蛋白表达 |
| 敏感细胞或动物实验 | <0.01 EU/μg | 原代、干细胞、免疫细胞及体内研究 |
| 极敏感应用 | <0.005 EU/μg | 对炎症背景和批次一致性要求极高的项目 |
技术说明：内毒素是革兰氏阴性菌细胞壁中的脂多糖（LPS），可降低转染效率，并通过TLR4通路激活炎症反应，诱导IL-1、IL-6、TNF-α等细胞因子，干扰目的基因表达；在动物实验中还会增加非特异性炎症风险。
酶切、连接、亚克隆、PCR、测序、探针制备与文库筛选。
适用于HEK293、HeLa、CHO等细胞的瞬时或稳定转染与蛋白表达，推荐转染级且超螺旋比例≥90%。
适用于原代细胞、干细胞、DC、T细胞和巨噬细胞，建议内毒素<0.01 EU/μg。
适用于小鼠/大鼠注射、瘤内注射及DNA免疫，建议超低内毒素并按需无菌处理。
用于mRNA、sgRNA体外转录及RNA探针制备，高纯度高超螺旋质粒有利于线性化与稳定转录。
用于慢病毒/AAV包装、DNA疫苗与大规模工艺开发，建议超螺旋比例≥90%及超低内毒素。
内毒素（Endotoxin/LPS）是大肠杆菌外膜的脂多糖成分，质粒制备过程中细菌裂解释放内毒素，若不去除会共纯化至质粒中。
内毒素对转染实验有三重负面影响：
(1)与质粒竞争结合细胞膜，降低转染效率；
(2)通过TLR4受体激活免疫细胞，诱导炎症因子释放，影响细胞状态；
(3)干扰基因表达调控，导致实验结果不可靠。
因此，细胞转染（尤其原代细胞、干细胞、免疫细胞等敏感细胞）和动物实验必须使用去内毒素质粒。
