质粒抽提试剂盒
ZY PurePrep质粒小量/中量制备试剂盒采用SDS-碱裂解法结合硅胶膜吸附技术，可快速从大肠杆菌培养液中提取高纯度质粒DNA，
适用于酶切、测序、PCR、连接、转化等常规分子生物学实验。
适用于酶切、测序、PCR、连接、转化等常规分子生物学实验。
2-4mL
小量适用菌液
4-6mL
中量适用菌液
~70μg
中量吸附柱容量
1.5年
室温稳定保存
小量适用菌液
中量适用菌液
中量吸附柱容量
室温稳定保存
采用经典的SDS-碱裂解法结合硅胶膜吸附技术，可快速、高效地从大肠杆菌培养液中提取高纯度质粒DNA。
提取的质粒DNA可直接用于酶切、测序、PCR、连接、转化等常规分子生物学实验。
小量试剂盒适用于2–4 mL过夜菌液，可扩展至4–6 mL，适合快速判断阳性克隆并满足测序、酶切验证等日常筛查需求。
中量试剂盒适用于4–6 mL过夜菌液，低拷贝质粒可扩展至10 mL，可获得较大量高纯度质粒。
| 产品名称 | 货号 | 规格 | 适用场景 | 价格 |
| ZY PurePrep 质粒小量制备试剂盒 |
ZY-PP-MINI-200 | 200次 | 重组子初筛、酶切鉴定、 测序前准备、PCR模板制备 |
询价 |
| ZY PurePrep 质粒中量制备试剂盒 |
ZY-PP-MED-50 | 50次 | 大量转化、多管酶切、体外转录、 细胞转染、质粒保种 |
询价 |
| 参数 | 小量制备试剂盒 | 中量制备试剂盒 |
| 货号 | ZY-PP-MINI-200 | ZY-PP-MED-50 |
| 规格 | 200次 | 50次 |
| 适用菌液体积 | 2–4 mL（可扩展至4–6 mL） | 4–6 mL（低拷贝可至10 mL） |
| 吸附柱容量 | — | 约70 μg |
| 典型得率 | μg–数十μg（视拷贝数与菌液量） | 约30–50 μg（4 mL LB，高拷贝） |
| 洗脱体积 | 50–100 μL | 100 μL |
| 操作时间 | 约25–35 min | 约35–45 min |
| 储存条件 | 15–25℃ 1.5年；2–8℃长期 | 15–25℃ 1.5年；2–8℃长期 |
| 运输条件 | 常温运输 | 常温运输（>30℃建议冰袋） |
说明：典型得率仅供参考，实际产量与质粒拷贝数、菌株状态、培养条件等因素相关。
| 步骤 | 操作条件 |
| 柱平衡 | 加入200 μL Buffer CBS，12,000 rpm离心1 min，弃废液 |
| 收集菌体 | 2–4 mL菌液，8,000 rpm离心1 min；4–6 mL可分2–3次合并 |
| 重悬 | 加入250 μL Solution I（已加RNase A），充分悬浮 |
| 裂解 | 加入250 μL Solution II，温和颠倒6–8次，室温不超过5 min |
| 中和 | 加入350 μL Solution III，颠倒8–10次，放置2–5 min，12,000 rpm离心5–10 min |
| 结合 | 上清转移至吸附柱，12,000 rpm离心1 min |
| 洗涤 | 500 μL Wash Solution，12,000 rpm离心1 min，重复一次 |
| 干燥 | 空柱12,000 rpm离心2 min，开盖室温放置数分钟 |
| 洗脱 | 50–100 μL Elution Buffer，37℃放置2 min，12,000 rpm离心1–2 min |
| 检测 | 取1–3 μL电泳检测，立即使用或-20℃冻存 |
| 步骤 | 操作条件 |
| 柱平衡 | 加入200 μL Buffer CBS，12,000 rpm离心1 min，弃废液 |
| 收集菌体 | 4–6 mL菌液，8,000 rpm离心1 min；低拷贝质粒可用10 mL |
| 重悬 | 加入500 μL Solution I（已加RNase A），充分悬浮 |
| 裂解 | 加入500 μL Solution II，温和颠倒4–6次，室温不超过5 min |
| 中和 | 加入700 μL Solution III，颠倒8–10次至白色混浊，放置2–5 min，12,000 rpm离心5–10 min |
| 结合 | 上清分两次转移至吸附柱，室温6,000 rpm离心1 min |
| W1洗涤 | 加入500 μL W1 Solution，12,000 rpm离心1 min |
| 洗涤 | 加入500 μL Wash Solution，12,000 rpm离心1 min，重复一次 |
| 干燥 | 空柱12,000 rpm离心1 min，开盖室温放置数分钟 |
| 洗脱 | 加入100 μL Elution Buffer，37℃放置2 min，12,000 rpm离心1 min |
| 检测 | 取1–3 μL电泳检测，立即使用或-20℃冻存 |
| 控制环节 | 文档要求 | 目的 |
| RNase A配制 | 全部加入Solution I，混匀后4℃保存并标注日期；长期不用请-20℃保存 | 减少RNA污染 |
| 菌体重悬 | 充分悬浮菌体，避免残留菌块 | 保证裂解均匀 |
| 碱裂解 | 加入Solution II后立即温和颠倒混匀；室温静置不超过5 min | 减少基因组DNA污染 |
| 中和澄清 | 温和颠倒8–10次，放置2–5 min后按要求离心 | 充分沉淀蛋白和杂质 |
| 柱洗涤 | Wash Solution洗涤后重复一次；中量另含W1洗涤 | 提高质粒纯度 |
| 柱干燥 | 空柱离心后开盖室温放置数分钟，彻底晾干 | 避免残留乙醇影响下游实验 |
| 洗脱 | 小量50–100 μL，中量100 μL；37℃放置2 min后离心 | 获得稳定回收率 |
| 结果检测 | 取1–3 μL电泳检测，产物立即使用或-20℃冻存 | 确认产物并妥善保存 |
小量制备适合重组子初筛、酶切鉴定和高通量常规筛查。
高纯度质粒DNA可直接用于测序前准备和PCR模板制备。
中量制备支持多管酶切、大量转化和多批次分子克隆实验。
较大量高纯度质粒可用于细胞转染、体外转录及质粒保种。
