2–3片段反应时间
多片段同步拼接
兼容插入片段范围
PCR至涂板全流程
基于一步法同源重组（Gibson Assembly）原理，将DNA外切酶、DNA聚合酶与DNA连接酶活性集成于一体。
只需将线性化载体与两端携带15–25 bp同源臂的PCR片段混合，50℃反应20 min即可完成单片段或多片段精准定向克隆，连接处不引入额外碱基序列。
2–3片段在50℃孵育20 min即可完成精准组装；4–6片段延长至60 min。重组产物不引入额外序列，可直接转化感受态细胞。
| 产品名称 | 货号 | 规格 | 适用场景 | 价格 |
| ZY Fusion one step 无缝克隆试剂盒 |
ZY-Fus-20 | 20T | 基因克隆、表达载体构建、报告基因组装、 合成生物学多片段拼接； 兼容50 bp–10 kb片段 |
询价 |
| 项目 | 内容 |
| 产品组成 | 2× ZY-Fusion Master Mix（200 μL） Positive linearized pUC Vector（250 ng，25 μL） Positive Control Insert（500 ng，25 μL） |
| 储存及运输 | -20℃保存，冰袋运输；避免反复冻融 |
| 有效期 | 2年 |
| 反应条件 | 50℃孵育20 min（2–3片段）/ 60 min（4–6片段） |
| 适用范围 | 单片段至4–6片段定向克隆与无缝拼接 |
| 科研用途声明 | 本产品仅供科学研究使用，不得用于临床诊断或治疗 |
仅有携带同源序列的末端才能发生互补配对，可有效避免非特异性重组；连接产物可直接转化感受态细胞。
| 步骤 | 操作要点 |
| 1. 制备线性化载体 | 限制性内切酶酶切（推荐双酶切+胶回收）或反向PCR；PCR法建议用Dpn I消化甲基化模板质粒 |
| 2. 制备插入片段 | 引物5'端引入15–25 bp同源序列，使用高保真酶PCR扩增并纯化 |
| 3. 配制重组反应 | 按比例混合线性化载体与插入片段，加入2× ZY-Fusion Master Mix，补超纯水至20 μL |
| 4. 等温孵育 | 50℃ 20 min（2–3片段）或60 min（4–6片段）；不能及时转化可-20℃暂存 |
| 5. 转化培养 | 转化感受态细胞，涂布抗性平板，37℃培养过夜 |
| 6. 克隆鉴定 | 菌落PCR或酶切鉴定；建议设置阴性对照，避免假阳性 |
| 组分 | 2–3片段拼接 | 4–6片段拼接 | 阳性对照 |
| PCR产物 + 线性化载体质粒 | X μL（0.02–0.5 pmol） | X μL（0.2–1 pmol） | 10 μL |
| 2× ZY-Fusion Master Mix | 10 μL | 10 μL | 10 μL |
| 超纯H₂O | 补至20 μL | 补至20 μL | |
| 总体积 | 20 μL | 20 μL | 20 μL |
将目的DNA片段精准插入任意载体位点，无需依赖酶切位点且不引入额外序列。
快速完成ORF与表达载体的无缝组装，为蛋白表达和功能研究提供高效工具。
精准拼接启动子、报告基因及调控元件，构建报告系统和功能验证载体。
支持一次反应拼接2–6个DNA片段，适合复杂载体与合成生物学组装。
兼容50 bp小片段至10 kb大片段，可将目的片段插入常见载体的任意位置。
