即用型预混液
兼容主流qPCR平台
推荐扩增片段长度
推荐扩增循环数
ZY Quant Star qPCR Premix 是质因生物推出的 SYBR Green I 嵌合荧光染料法专用实时荧光定量 PCR 试剂。采用 2× 预混液形式，已包含除引物与 DNA 模板以外的全部 qPCR 组分，显著简化加样流程、缩短操作时间、降低交叉污染几率。
核心组分为经抗体修饰的热启动 Taq DNA 聚合酶，配合优化 Buffer 体系与 PCR 反应促进因子，可有效抑制非特异性扩增与引物二聚体。预混液加入 Universal 校正染料，兼容需要 ROX 校正的各类 qPCR 仪器，无需额外添加染料。
| 产品名称 | 货号 | 规格 | 检测方法 | 价格 |
|
ZY Quant Star qPCR Premix |
ZY-QS-1000 | 1 mL | SYBR Green I 染料法 （实时荧光定量 PCR） |
询价 |
| 试剂 | 使用量 |
| ZY Quant Star qPCR Premix | 5 μL |
| 正向引物（10 μM） | 0.4 μL |
| 反向引物（10 μM） | 0.4 μL |
| DNA 模板 | X μL |
| Nuclease-Free Water | 补足至 10 μL |
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 30 sec | — |
| 变性 | 95℃ | 10 sec | 40 个循环 |
| 退火 & 延伸 | 60℃ | 30 sec | |
| 熔解曲线 | 仪器默认 | 仪器默认 | — |
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 30 sec | — |
| 变性 | 95℃ | 10 sec | 40 个循环 |
| 退火 | 55–65℃ | 10 sec | |
| 延伸 | 72℃ | 30 sec | |
| 熔解曲线 | 仪器默认 | 仪器默认 | — |
推荐模板加样量 1–2 μL；未稀释 cDNA 原液不超过总反应体系的 10%。退火/延伸温度依据引物 Tm 值设定；扩增片段 ≤200 bp 时延伸时间可设为 15 sec。Mix 应避强光，使用前轻柔混匀，请勿涡旋振荡；无需额外添加 ROX。
不需要。Mix 含 Universal 校正染料，适用于所有机型，配制体系时只需加入引物与模板。
多为荧光信号太弱、经系统校正后产生。确保预混染料未降解，并使用荧光信号收集更好的 qPCR 专用耗材。
常因模板浓度较高、基线终点值大于 Cq 值。可减小基线终点（Cq 值 -4）后重新分析数据。
通常由反应管内气泡导致。确保 Mix 完全溶解、勿涡旋；加样后轻弹离心；可延长预变性至 10 min。
检查循环数是否达到 40、荧光采集步骤是否正确、引物是否降解，以及模板浓度是否过低或模板是否降解。
可能由扩增效率低、模板浓度过低、模板降解、产物过长或 PCR 抑制剂引起，可提高引物浓度、改用三步法、重新设计引物或加大模板稀释倍数。
可能是引物设计不佳或浓度过高，或 cDNA 模板存在基因组污染。可重新设计引物、降低浓度或用 DNA 酶去除基因组污染。
注意加样误差、模板浓度及仪器孔间温度偏差。使用精准移液器和高品质吸头，必要时放大反应体积并定期校准仪器。
可能为体系污染或引物二聚体。先更换空白对照用水，仍异常则更换引物、吸头、PCR 管或启用新 Mix，并在超净台内配制。
常规推荐两步法；提高特异性可提高退火温度或使用两步法，提高扩增效率可使用三步法或延长延伸时间。
