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siRNA定制化合成和修饰
siRNA定制化合成和修饰
提供siRNA化学修饰与荧光标记定制合成服务，通过2'-OMe、5'-NH2、5'-磷酸、5'-胆固醇及FAM/Cy3/Cy5/Cy5.5/Biotin等修饰优化稳定性、沉默效率与可视化追踪。
所有修饰siRNA均经质谱验证（可选）修饰位点，HPLC纯度≥90%，保证序列100%正确。
立即咨询

  • 6-8个工作日

    修饰siRNA交付

  • ≥ 90%

    HPLC纯度

  • 100%

    序列与修饰位点验证

  • 9类

    常用修饰与标记

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简介
选择指南
服务优势
服务详情
服务流程
交付标准
质量控制标准
siRNA性能
应用场景
常见问题
siRNA定制化合成与修饰
化学修饰siRNA
荧光/标记修饰siRNA

siRNA定制化合成与修饰

种类全面，灵活定制

未修饰siRNA易被核酸酶降解、血清半衰期较短，且缺乏功能标签。化学修饰和荧光标记可优化siRNA性能并引入检测功能。

我司提供siRNA化学修饰与荧光标记定制合成服务。所有修饰siRNA均经质谱验证（可选）修饰位点，HPLC纯度≥90%，保证序列100%正确。

  • 化学修饰：增强稳定性、促进摄取、提升沉默效率
  • 荧光/标记修饰：监控转染、追踪定位、实现亲和纯化
  • 其他修饰类型或多修饰组合定制

化学修饰siRNA

增强稳定性、促进摄取、提升沉默效率

通过在糖环、磷酸骨架或末端位置引入特定基团，改善生物稳定性、药代动力学性质及沉默活性。

  • 2'-O-甲基：增强核酸酶抗性、降低免疫原性与seed区脱靶
  • 5'-氨基：提供后续偶联反应活性位点
  • 5'-磷酸：优化反义链RISC装载并提升沉默效率
  • 5'-胆固醇：增强膜透过性，促进难转染细胞摄取

荧光/标记修饰siRNA

监控转染、追踪定位、亲和纯化

荧光染料和亲和标签通常连接至正义链5'或3'端，以减少对反义链RISC装载功能的干扰。

  • FAM：Ex 495/Em 520，绿色荧光监控转染效率
  • Cy3：Ex 550/Em 570，橙红荧光共定位研究
  • Cy5：Ex 649/Em 670，多色成像及FRET
  • Cy5.5：Ex 675/Em 694，近红外活体深层成像
  • Biotin：亲和纯化、pull-down或ELISA检测

修饰选择指南

根据实验场景选择合适的修饰类型与位置
实验场景 推荐修饰 说明
常规细胞转染 FAM或Cy3荧光标记 监控转染效率，不影响沉默活性
稳定性增强 2'-OMe糖修饰 增强核酸酶抗性，延长半衰期
脱靶最小化 反义链seed区2'-OMe 降低miRNA样脱靶，保留on-target活性
提升沉默效率 5'-磷酸 反义链5'-P促进RISC装载
增强细胞摄取 5'-胆固醇偶联 增强膜透过性和转染效率
多色/FRET研究 Cy3+Cy5双标记 适合FRET或共定位研究
体内深层成像 Cy5.5近红外标记 组织穿透深，适合活体成像
亲和纯化/pull-down Biotin生物素标记 链霉亲和素磁珠pull-down互作蛋白
后续偶联 5'-氨基 提供氨基用于后续化学偶联

服务优势

多种修饰类型、灵活组合与专业方案支持
  • 先进合成平台 · 质谱验证（可选）
    每条修饰siRNA均经MS检测（可选）分子量，确保修饰位点正确；HPLC纯度≥90%，批次稳定。
  • 多种修饰类型 · 灵活组合
    支持4种化学修饰和5种荧光/标记修饰，可进行单一或多修饰组合定制。
  • 修饰方案咨询 · 技术支持
    根据实验目标推荐修饰类型和位置，并支持性能评估定制QC项目。
  • 灵活规格 · 快速交付
    5nmol起至mg级多种规格，修饰siRNA 6-8个工作日交付，批量合成享阶梯折扣。

服务详情

覆盖化学修饰、荧光标记与组合定制
分类 修饰类型 规格 纯化 周期 说明
化学修饰
 2'-OMe 5nmol起 OPC/HPLC 6个工作日 增强稳定性，
降低脱靶
5'-NH2 5nmol起 OPC/HPLC 6个工作日 偶联反应活性基团
5'-Phosphate-on 5nmol起 OPC/HPLC 6个工作日 促进RISC装载
5'-Cholesterol 5nmol起 OPC/HPLC 6个工作日 增强细胞摄取
荧光标记
 FAM 5nmol起 OPC/HPLC 6个工作日 绿色荧光，
转染监控
Cy3 5nmol起 OPC/HPLC 6个工作日 橙红荧光，
共定位
Cy5 5nmol起 OPC/HPLC 6个工作日 远红荧光，
多色/FRET
Cy5.5 5nmol起 OPC/HPLC 6个工作日 近红外，
活体成像
Biotin 5nmol起 OPC/HPLC 6个工作日 pull-down/
亲和纯化
其他定制
 其他或多修饰组合 5nmol起 OPC/HPLC 6-8个工作日 按客户需求定制

服务说明：保证修饰位点正确（质谱验证（可选）），不保证修饰siRNA的干扰效果；如需效率保证，建议选择siRNA三保一套餐配合修饰附加服务。

服务流程

四步完成修饰方案确认、合成质检与交付
  • 提交需求
    提供siRNA序列或靶基因信息、修饰类型与位置、规格及纯化方式。
  • 确认方案
    1个工作日内出具修饰方案、分子量计算、周期及报价。
  • 签约合成
    完成修饰链合成、退火、纯化及MS验证（可选），出具QC报告。
  • 交付售后
    冻干粉发货并附报告，提供性能咨询及转染条件建议。

交付标准

修饰信息与质控报告完整交付
  • siRNA冻干粉
    1OD分装，-20°C避光保存，复溶即可使用。
  • RNA合成报告
    含序列、修饰类型与位置、分子量、纯化方式、OD值/浓度。
  • 质谱检测报告（可选）
    MS图谱验证（可选）合成序列及修饰后分子量正确。
  • 纯度检测报告
    HPLC纯化规格附色谱图，纯度≥90%。
  • 使用说明书
    复溶方法、保存建议和转染参考条件。

质量控制标准

修饰位点、纯度、配对与外观的完整质控
QC项目 检测方法 合格标准
修饰位点正确性 质谱(MS)（可选）分子量测定 实测分子量与理论修饰后分子量偏差≤0.1%
纯度 HPLC/OPC OPC:≥75%; HPLC:≥90%
双链配对 非变性PAGE/CGE 双链比例≥85%
外观 目视检查 白色或类白色冻干粉

修饰如何影响siRNA性能？

从稳定性、递送摄取到检测纯化，不同化学修饰从多个维度优化siRNA性能或赋予可检测功能
01.稳定性与活性优化

通过化学修饰增强稳定性并优化RISC装载：

  • 2'-OMe修饰：增强核酸酶抗性、降低免疫原性、减少miRNA样脱靶，同时尽量不影响on-target活性
  • 5'-磷酸：促进Argonaute识别和RISC装载，绕过细胞内磷酸化限速步骤，提高沉默效率
02.改善递送与细胞摄取

通过偶联基团增强膜亲和力与入胞能力：

  • 5'-胆固醇：利用疏水性增强膜亲和力，促进内吞摄取，在无转染试剂时也能实现一定入胞
03.赋予检测、示踪与纯化功能

通过标记实现可视化监控与亲和纯化：

  • 荧光标记（FAM/Cy3/Cy5/Cy5.5）：用于转染效率监控、细胞定位、多色共定位/FRET及活体成像
  • Biotin：用于pull-down捕获RISC或RNA结合蛋白，以及ELISA-like定量检测，需配合链霉亲和素显色或荧光检测

应用场景

覆盖沉默优化、实验质控与机制互作研究

优化敲低效果与稳定性

利用5'-磷酸、2'-OMe和5'-胆固醇提升RISC装载、核酸酶抗性及难转染细胞摄取。

实验过程质控与可视化

通过FAM/Cy3监控转染效率，并使用Cy5.5追踪细胞或体内动态分布。

机制解析与互作研究

通过Cy3+Cy5双标记开展FRET研究，或以Biotin pull-down捕获siRNA互作蛋白。

常见问题

关于siRNA修饰、标记与实验应用的常见问题
siRNA必须要修饰吗？
常规细胞系（如HEK293、HeLa）可不修饰直接使用。
建议修饰的情况：需监控转染效率（荧光标记）、增强稳定性（2'-OMe）、提升沉默效率（5'-磷酸）或促进摄取（胆固醇）。至少推荐荧光标记对照用于转染监控。
2'-OMe修饰的作用和位置？
作用：增强核酸酶抗性、降低seed区脱靶。
位置：正义链末端（提升稳定性）、反义链seed区2-8位（降低脱靶）；反义链9-11位切割点附近应避免。
5'-磷酸修饰必须加吗？
非必须。常规细胞自身激酶可完成磷酸化；
需要快速起效、低浓度实验或激酶活性较低的细胞（原代/干细胞）时建议添加，以确保RISC装载效率。
荧光标记会影响沉默效率吗？
标记在正义链3'或5'端影响很小，因正义链不参与切割且RISC装载后被丢弃。避免标记在反义链上，以免干扰装载与切割活性。
FAM/Cy3/Cy5/Cy5.5怎么选？
· 常规转染监控选FAM（绿色，最经济）；
· 多色共定位/FRET研究选Cy3+Cy5配对；
· 活体深层成像选Cy5.5（近红外）。
选型前确认仪器匹配的检测通道。
5'-胆固醇修饰有什么用？
· 增强细胞膜亲和力，促进内吞摄取；
· 适合转染试剂敏感的细胞或无转染试剂的摄取机制研究；
· 偶联后溶解度略降，复溶需充分混匀。
Biotin标记怎么用？
利用生物素-链霉亲和素超高亲和力（Kd≈10⁻¹⁵ M），将Biotin-siRNA固定在磁珠上，从裂解液中pull-down互作蛋白（如RISC组分），经WB或质谱鉴定。生物素非荧光，需配合HRP/荧光标记链霉亲和素检测。
修饰会降低沉默效率吗？
合理修饰影响很小（正义链荧光标记、2'-OMe等可保留>90%活性），但位置不当（如切割位点修饰、反义链标记）会显著降低效率。建议先用未修饰序列验证活性，再叠加修饰，并提供修饰方案咨询与定制QC。

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